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基因沉默

 

RNA 干扰(RNA  interference,RNAi)是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象,它是指当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链 RNA(dsRNA)时,靶基因mRNA发生降解而导致基因表达沉默过程。由于RNAi具有高度的序列专一性和有效的干扰,可以特异地将特定的基因沉默, 从而获得基因功能丧失或基因表达量的降低,这种技术已经成为研究基因功能的重要工具,并将在病毒病、遗传性疾病和肿瘤病的治疗方面发挥重要作用。赛伯(Cypeogen ) 生物应用RNAi Designer软件平台,可对靶基因序列进行干扰位置效应评价和序列同源型分析,完成shRNA/micRNA等多种序列的设计,并提供一站式RNAi解决方案。



赛伯(Cypeogen ) 生物提供以下基因沉默实验策略和定制服务



RNAi载体构建服务


      ♦    利用细胞内源性miRNA加工机制,更高效地表达RNA发夹结构,采用GFP表达追踪和顺式表达多个miRNA的优点。

         每个基因设计的3条RNAi Select序列,我们保证至少有1-2条可以达到至少70%转录水平knockdown(在转染效

            率>80%的前提下)。

      ♦    针对特定靶基因的mRNA序列设计shRNA引物,并将其构建到由U6或H1启动子介导的慢病毒表达载体中。

      ♦    利用抗生素及GFP/RFP来筛选稳定表达shRNA或miRNA的稳定细胞株和构建基因沉默的细胞系



RNAi干扰效果检测


    ♦    通过Real-time PCR方法检测细胞在转染RNAi后,靶基因mRNA水平的干扰效果。

    ♦    通过Wester blot方法检测蛋白水平的基因干扰效果。




定制化技术服务


         ♦    microRNA干扰技术服务

             shRNA干扰技术服务




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