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细胞建模


      动物细胞稳定表达外源重组蛋白可利用质粒转染和慢病毒感染等方式实现,利用脂质体包裹质粒转染筛选获得稳定的转染细胞需至几个月时间,而利用病毒表达系统则可快速感染细胞,在几天内使外源基因整合到细胞染色体稳定表达,借助于慢病毒载体表达系统构建稳转细胞系这一方法已广泛应用。慢病毒及逆转录病毒,常用的真核表达载体及病毒载体中都携带抗药性筛选基因和示踪基因。筛选后可以获得稳定表达外源基因或沉默内源基因的细胞系。



利用慢病毒系统提供基因过表达稳转细胞株(系、基因knockout稳转细胞株(系)构建定制服务


         


服务项目列表如下:

            


   








技术特

        ♦  技术平台:慢病毒表达系统

        ♦  药物筛选

 

服务流程

        ♦  药物浓度测定:通过空白细胞施药检测,以10-12天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度。

        ♦  以转染当天培养皿中细胞达到70%-80%覆盖为接种条件。

        ♦  脂质体或慢病毒细胞转导。

        ♦  抗生素药物筛选。

        ♦  鉴定筛选结果(Q-PCR和WB)。

 

客户提供

        ♦  目的基因质粒或者构建好的基因表达载体。

        ♦  靶细胞系(规格不少于1X10^6细胞,可稳定传代,细胞倍增时间小于48小时。对于cas9/gRNA knockout细胞模型构建,要确

           保靶基因被knockout之后,不会发生严重的细胞凋亡现象)。

        ♦  细胞培养条件的说明。

 

我们提供

        ♦  完整实验报告

        ♦  稳转细胞系及相关实验报告

 





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